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宠物犬猫贾第鞭毛虫病的诊断与治疗

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李守杰

摘 要:贾第鞭毛虫作为一种人畜共患寄生虫,严重危害着宠物犬猫的健康。文章从宠物犬猫贾第鞭毛虫病的感染症状、流行特点、诊断、治疗、预防等几个方面作了论述,指出要重视诊断方法以及药物的选择,尽早建立科学的治疗方案,增加犬猫的抗病能力。

关键词:宠物犬猫;贾第鞭毛虫病;诊断;治疗;预防

贾第鞭毛虫是可感染人、宠物犬猫等的重要人兽共患致病性寄生虫。在分类学上贾第虫属于原生动物门、鞭毛虫总纲、动物鞭毛虫纲、双滴目、六鞭科、贾第属。根据显微镜下形态学差异、超微结构和宿主来源,目前将贾第虫分为6种:敏捷贾第虫、苍鹭贾第虫、鹦鹉贾第虫、微小贾第虫、鼠贾第虫和蓝氏贾第鞭毛虫。近年来,黑龙江省、四川省、河南省和上海市等地都有犬猫贾第虫流行情况及感染的报道。犬贾第虫感染率比猫高,部分地区可高达25.20%,严重影响犬的生长发育。临床上猫的发病报道较少,但群饲的猫易感染贾第虫。猫由于群居环境不卫生,特别是粪便、水的污染等是导致猫感染贾第鞭毛虫病逐渐增多的主要原因。

1 感染症状

犬作为家养动物或实验动物,与人类关系密切,可作为贾第虫感染的储蓄宿主,具有传播感染的潜力[ 6-7 ]。绝大多数犬和猫感染后,粪便中虽有卵囊排出,但无特别明显的临床症状。少数成年犬感染后,呈短暂的间歇性腹泻或慢性腹泻,排出含大量泡沫样的稀便,且粪便恶臭,颜色暗淡或呈脂肪痢,精神沉郁,食欲减退,渐进性消瘦以及贫血、呕吐,体温一般不高。剖检时可见肠道不同程度的溃疡、出血,小肠、大肠中亦可见虫体。仔犬窝内的交叉感染率较高,可达100%,症状也较重,表现为精神沉郁,并有先急后重及间歇性腹泻,粪便呈现灰色,并带有黏液和血液,且腹泻2 d后开始出现脱水、消瘦等症状。猫感染后幼猫可见腹壁胀气,大便黄色糊状,肛门松弛,被毛粗糙,偶有带血或果冻样稀便。成年猫几乎不呈现腹泻症状,但会成为潜在的带毒者。感染后粪便中往往会有虫体排出,如有其他猫或别的宠物食入粪便,或污染了食物或饮水,则食入者就有可能感染贾第鞭毛虫。

2 流行特点

在国外宠物犬猫贾第虫病研究中,发现欧洲犬样品8 000多只和猫样品4 000多只,其中分别有24.8%和20.3%的样品呈贾第虫阳性,<6月龄的犬和猫感染率高。在德国,犬和猫感染此病的几率差不多是英国、西班牙、荷兰和意大利的2倍,比利时感染率更高。我国调查显示,犬贾第虫阳性率为4.5%~25.2%。幼龄犬更容易感染贾第虫的原因,可能与其免疫系统发育不完善有关。雌性犬和雄性犬贾第虫阳性率无统计学意义(P<0.05)。这一流行性的原因可能与猫个体免疫力、临床诊断手段和诊断技术的提升、猫的寿命增加等多种原因有关。因此,在对犬猫进行临诊时,发现急慢性腹泻,都应对其进行合理怀疑及检查,以免错过最佳治疗时间,增加感染其他动物的机会。

贾第鞭毛虫属于兼性厌氧真核生物,贾第虫缺乏线粒体、过氧化物酶体、高尔基复合体等细胞器,但有细胞骨架。生活史中包括滋养体和包囊两个阶段。滋养体为营养繁殖阶段,包囊为传播阶段。贾第虫的传播以包囊为主,包囊随粪便排出体外后,会污染食物和水,在被犬猫食入后而感染。目前,牡蛎等贝类水产动物体内已发现有贾第虫的感染,犬猫生食或半生食这些水产动物也会感染。包囊在十二指肠内脱囊变成滋养体,在肠壁和胆囊中寄生并繁殖。犬的滋养体一般在小肠上段,猫则在小肠下段。滋养体在寄生和繁殖时,会引发肠炎。滋养体到达肠后端,形成包囊,随后随粪便排出体外。贾第虫的致病机制尚不完全清楚,一般认为,患病犬猫发病情况与自身的免疫力和抵抗力、虫株毒力、饲养环境等多种影响因素有关。一旦出现严重感染,虫体寄生在肠道内,容易形成机械性阻塞。虫体滋养体通过吸盘吸附于肠黏膜上又会形成机械性刺激,出现炎性反应,对肠黏膜造成一定程度的损伤;虫体分泌物和代谢产物对肠黏膜、微绒毛也会产生不同的刺激,导致肠功能出现紊乱。贾第虫宿主的感染具有一定的特异性。温少芳等认为贾第虫可分为聚集体A、B、C、D、E 5种,且贾第虫株聚集体D为犬科动物特有的基因型,不会感染人和其他动物。齐萌等认为,A和B群主要感染人,C和D群主要感染犬,E群主要感染牛、羊、猪、马等,F群主要感染描,G群主要感染鼠,A群有时也会感染猫。

3 诊 断

目前,国家标准中并未列出蓝氏贾第鞭毛虫的检测方法。近些年,犬猫贾第鞭毛虫的诊断主要采用病原学诊断、免疫学诊断、分子生物学等诊断方法。其中,直接镜检法、快速姬姆萨染色法和多重PCR方法在临床上均能快速检出贾第鞭毛虫,可用于贾第鞭毛虫病的快速诊断。

3.1 病原学诊断

贾第鞭毛虫的形态学研究起步较晚。最初,研究者为了研究蓝氏贾第鞭毛虫的结构,采用直接镜检法或者快速姬姆萨染色法进行诊断。实时动态显微视频摄录技术也在跟踪和监测寄生虫方面能起到很大作用,可观察到滋养体和包囊的典型形态及运动方式。陈阳等用改良TYI-S-33培养基对滋养体进行培养,用透射电镜观察虫体的超微结构,结果观察到虫体的质膜、内质网、核膜、核质、核仁以及二联微管结构[16]。

3.1.1 直接镜检法诊断

粪便镜检是临床常用的简单可靠的诊断方法,通常是采集宠物犬猫的腹泻粪便,采用直接涂片法可以观察到滋养体。在犬猫患病急性或间断腹泻期间,粪便多呈水样或糊状,检查时为避免滋养体死亡应采集新鲜标本。送检的标本应注意保温,以确保滋养体保持一定的活力。在疾病的后期,假如粪便已基本成形,为了检测包囊,一般可采用2%的碘液直接涂片法即可确诊。为了提高检出率,亦可采用相对密度1:18的硫酸锌浮聚或醛-醚浓集等方法,但在蔗糖或其他漂浮液中包囊会收缩变形影响鉴别。因为包囊是间断排出的,检查时可增加检查频率来提高检出率。相差显微镜有助于鉴别贾第虫滋养体和包囊。如果没有相差显微镜的话,在盖玻片边缘加卢戈氏碘液1滴,使滋养体和包囊着色,增加虫体内细胞核的反差,使之更容易鉴定。贾第虫包囊在无症状宿主的正常粪便中同样能够观察到。但也有少数病例虽然出现了临床症状,但容易造成漏检,在粪便中既找不到包囊,也找不到滋养体,所以需要多次采集进行鉴定为宜。

3.1.2 快速姬姆萨染色法诊断

采用此方法检查时,取待测粪便样本,置洁净离心管中,加入磷酸盐缓冲液稀释,混匀,室温静置5 min,取中上层液体做滴片,姬姆萨快速染色,动态显微镜观察结果[17]。也可利用内窥镜摘取黏膜组织,制作压片,固定,姬姆萨染色观察,可见鞭毛虫着紫色,肠上皮细胞呈粉红色。如果是剖检的宠物肠样本,可用新鲜配制的姬姆萨液,对样本中鲜活虫体进行快速染色,利用动态显微摄录,观察、记载虫体特征,随后进行鉴定。

3.2 免疫学诊断方法

酶联免疫吸附试验(ELISA)。既可以检测抗体,也可以检测抗原,诊断阳性率高,但操作过程较为烦琐,且对荧光显微镜要求高。间接荧光抗体试验(IFA)是用荧光标记抗体方法进行检验。对流免疫电泳(CIE)法是通过检测粪内抗原进行确定,诊断可靠性较高。

3.3 分子生物学诊断

生物素标记贾第虫滋养体全基因组DNA近年来已获得较大突破。邓国超等研究了猫源贾第虫EF1α和GDH基因的扩增与分析,首次采用两组引物EF1-F、EF1-R和GDHeF、GDHiF、GDHiR通过普通PCR及套式PCR方法对两基因片段进行特异性扩增,为贾第虫分子学研究奠定了基础[19]。张萍等针对犬源贾第虫16S rRNA基因片段设计一对引物,建立了贾第虫DNA的SYBR GreenⅠreal-time PCR检测方法[20]。顾有方等首先对粪样基因组DNA提取。按粪便DNA提取试剂盒说明书操作。所得DNA溶于50 μL洗脱缓冲液(TB)中,并于20 ℃保存备用。然后采用基因的巢式PCR方法对所有粪样进扩增,并对获得的阳性扩增产物进行测序和生物信息学分析,最后确定蓝氏贾第鞭毛虫的聚集体。李雅文等应用PCR技术对广州市某宠物寄养所采集的一株D型犬源贾第虫和一株F型猫源贾第虫的核糖体IGS序列进行了扩增、克隆、测序,并建立了PCR检测方法[21]。结果显示D型犬源贾第虫和F型猫源贾第虫的IGS序列存在多态性现象,种间差异明显。

4 治 疗

4.1 治疗原则以驱虫、消炎、对症治疗为主

犬感染贾第虫病使用甲硝唑是临床首选的治疗药物,然而有效率在50%~60%,比较低。同时在狗猫身上应用也有一定安全顾虑,甲硝唑对贾第虫有直接杀灭作用,也能干扰白胞与内皮细胞的黏附作用、抑制炎症细胞的移行,起到免疫调节、增强免疫功能[22]。另外,甲硝唑的硝基还原中间代谢产物,对病变黏膜尚有修复作用。但甲硝唑胃肠道反应较强,所以要谨慎使用。甲氰咪胍可减少胃酸分泌,对抑制甲硝唑的消化道不良反应有效。甲氰咪胍还可阻滞肠上皮肥大细胞、嗜铬细胞释放组胺和5-羟色胺,而使胃肠蠕动减慢,有利于肠道黏膜损伤修复。阿苯达唑治疗贾第鞭毛虫也有效,但是对于猫狗并不安全。欧洲批准了芬苯达唑用于狗的贾第鞭毛虫感染治疗,治疗时,可按照50 mg·kg-1,1次·d-1,连用3~5 d,能够有效驱除狗的贾第鞭毛虫感染[23]。双羟萘酸噻嘧啶和吡喹酮的复方制剂,可以用于狗的贾第鞭毛虫治疗,1次·d-1,连用3 d。罗硝唑既有驱虫作用,也有抗菌作用,对贾第鞭毛虫病的治疗效果也明显。呋喃唑酮(使用5 d)的疗效与甲硝唑相近,临床多用混悬剂,这样更易于治疗感染幼猫。丙硫咪唑(猫连续用5 d)和芬苯达唑(猫均使用5 d)治疗本病同样有效。口服替硝唑对犬猫贾第虫感染治疗效果也较好,疗程为6~7 d,临床应注意个别犬猫容易出现胃肠道反应。

4.2 注意纠正脱水和调节电解质失衡

脱水是患病犬猫的普遍并发症,呕吐、腹泻都可能导致脱水。患病犬猫脱水后可出现厌食、昏睡、虚脱。脱水的治疗主要是采用静脉输液来纠正脱水状态,并解决电解质和酸碱紊乱问题。临床往往根据脱水的程度进行补液,并随时调整补液量。

4.3 呕吐和食欲不振的治疗

食欲对犬猫的恢复起着很关键的作用,且影响到患病犬猫的生存质量。食欲减退会降低犬猫对疾病的抵抗力。呕吐要注意积极治疗,因为呕吐会导致脱水、低血钾症、酸中毒等。食欲不振时,应减少饮食中蛋白质的摄入量。恶心和呕吐的治疗可使用H2抗组胺药抑制胃酸、使用爱茂尔等止吐药抑制恶心和呕吐、使用硫糖铝保护黏膜等。

5 预 防

5.1 疫苗预防

美国富道动物保健公司生产的犬的Giardia Vax和猫的Fel-O-VaxGiardiat已批准用来预防犬的贾第虫病,并且已向美国农业部提交了使用效果的数据作为获准的部分材料。然而,多数兽医认为这些疫苗使用价值不大,只有少数人认为有效。所以,疫苗预防贾第虫病还存在很多争议。

5.2 定期驱虫

定期进行体内外驱虫,对控制贾第鞭毛虫病的发病效果良好。犬的常规体内驱虫推荐选择拜宠清(1次·90 d-1)或者犬心宝(驱虫种类最多,除肠道寄生虫还可驱心脏寄生虫,要求1次·30 d-1),体外驱虫推荐福莱恩,夏秋季1次·30 d-1,冬春季1次·90 d-1;猫的常规体内驱虫推荐选择猫宠清(1次·90 d-1)。体外驱虫推荐福莱恩或者大宠爱,如果散养,建议体外驱虫1次·30 d-1。如果家养,则1次·90 d-1进行体外驱虫。群养犬猫爆发贾第鞭毛虫感染时,必须要对全群一起投放抗贾第鞭毛虫的药物,如仅对发病的犬猫作治疗处理,其粪便中排泄出的滋养体或包囊又会感染群内其他犬猫,造成疾病继续传播。

5.3 排泄物处理,特别要注意粪便的消毒处理

贾第鞭毛虫属于人畜共患传染病,在人类及犬猫之间是会互相传染的,尤其对于抵抗力差的儿

童及老人或免疫不全患者而言,要谨慎预防贾第鞭毛虫感染。所以在处理犬猫的粪便时,应该注

意到卫生防护的问题,如果犬猫被确认感染,应避免让小孩、老人及免疫功能差的人来处理猫咪的排泄物。

5.4 隔离病原携带的犬猫

新购入的犬猫应先进行隔离及检验,确认无贾第鞭毛虫病原携带后才能和其他犬猫混养。尤其犬猫感染贾第鞭毛虫后,可能没有任何的临床症状,但在抗病能力下降及年老、虚弱的时候,贾第鞭毛虫就会大量增殖,并造成胃肠道症状,亦会危害其他健康犬猫。

6 小 结

贾第鞭毛虫作为一种人兽共患寄生虫病,越来越得到人们的重视,犬猫作为中间宿主,在其感染后积极治疗,对于犬猫自身或者人类的健康都有积极意义。特别是随着科学技术的发展,诊断手段和治疗方法也将越来越多。在贾第鞭毛虫病的诊治过程中,要注意以下几点。要对可疑患病犬猫作积极诊断,尽早确诊。使用驱虫药物时,建议两种药物作交替使用或联合使用,以防贾第鞭毛虫可能会对某些药物产生抵抗力。尽量选用优质日粮,增加宠物犬猫的抗病能力,尤其要注意在患有其他疾病或存在免疫缺陷时,会增加感染贾第鞭毛虫病的机会,或者在感染后增加治疗难度。日常饲养中,要注意环境的定期消毒,不要忽视贾第鞭毛虫卵对外界环境较强的抵抗力,这会增加犬猫重复感染的几率。总之,一旦确诊本病,应尽早制定科学的治疗方案,在用药的同时,尽量保持足够的营养摄入,积极治疗并发症,增加犬猫抗病能力。当然,这些问题的实现需要其主人的积极配合,真正完全治愈,还要依靠实验室的定期监测。

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